Sunday, February 17, 2019

Pengujian Avian Influenza Dengan Teknik Pcr

PENGUJIAN AVIAN INFLUENZA DENGAN TEKNIK PCR
(Polymerase Chain Reaction)
PERSIAPAN
-     Preparasi Sampel dan Reagen
               Persiapan sampel
·    Spesimen berupa organ,swab kloaka dan trachea, cairan allantois atau material yang diduga mengandung virus AI
·         Spesimen organ digerus (dihomogenisasi) dan ditambahkan PBS
·  Sentrifuge untuk memperoleh supernatan sebagai sampel untuk ektraksi RNA

-  Pengenceran Primer
·       Primer masih beku dibentuk untuk konsentrasi 200 picomol.
·       Ditambahkan NFW, DEPC, TE Buffer sebanyak yang dibutuhkan
·  Di aliquout (dibagi-bagi) primer stok kedalam beberapa tabung mikrotube
·   Untuk menciptakan dengan konsentrasi yang lebih rendah diambil 1 aliquout primer stok untuk diencerkan sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan dengan menambahkan NFW, DEPC, TE buffer sesuai kebutuhan.
·         Penyimpanan pada – 20o

Rumus pengenceran Primer
a.  Pengenceran primer Beku (200 picomol)




V
=
___ C ____



200


Keterangan:
V= Volume DEPC, NFW, TE buffer yang diharapkan untuk pengenceran
C= Konsentrasi primer beku dalam satuan picomol (konsentrasi awal dalam satuan nanomol atau nmol x 1000).

M 1 . V 1 = M 2. V 2

Keterangan:
M1 = Konsentrasi awal primer stok (200 picomol)
M2 = Konsentrasi primer yang diinginkan
V1  = Volume primer stok yang dibutuhkan
V2  = Volume primer yang diinginkan (V2 = V1 + volume NFW, DEPC, TE buffer yang dipakai untuk mengencerkan)

Pengujian Avian Influenza Dengan Teknik Pcr Rating: 4.5 Diposkan Oleh: abp29